（更正一下：之前的流速設置有問題，現改為30毫升每分鐘，而不是1毫升每分鐘，實驗室采用的是高壓液相色譜。）
幾分鐘后，流動相運行平穩，進出硅膠柱的細管中充滿了液體，不再存在氣泡。
目前樣品柱中的樣品巋然不動，并沒有在溶劑的裹挾下向下移動，這是因為當前的溶劑為純石油醚，極性非常小。
許秋打開紫外檢測器，設置5分鐘后A：B的體積比為也就是緩慢增大流動相的極性。
流動相的極性不能貿然的迅速提升，因為儀器只能控制當下抽取溶劑的比例。
換言之，儀器對流動相溶劑比例的控制是滯后的，硅膠柱中實際流動相的溶劑比例可能是十幾秒、幾十秒前的比例。
而液相色譜分離、提純的原理，主要是利用不同分子結構的物質，在色譜柱中移動所需的溶劑極性的臨界值不同。
也就是說，一旦流動相的極性過高，同時達到多種組分的臨界值，導致這些組分沒有被徹底分開，同時隨著流動相向下移動，再同時被收集，就意味著實驗失敗。
那么就要重新拌樣、旋蒸、填柱子、過柱子了。
這臺液相色譜儀同時只能處理一根柱子，所以許秋在操作的時候，韓嘉瑩去把另外兩個樣品填入小樣品柱，完成裝樣。
之后她沒事可做，便搬了個圓凳坐在他旁邊圍觀。
隨著時間的推移，A、B溶劑中B的體積分數緩慢提升。
“師兄，還沒反應啊，二氯甲烷都20%多了，還一動不動的。”
“這說明極性還是不到位，慢慢升吧。”
“感覺過柱子好費溶液呀。”看著旁邊溶劑桶的液面已經微微下降，韓嘉瑩吐槽了一句。
“是啊，而且是帶有反應產物的混合溶劑，想重復利用也比較麻煩，最多用來洗一洗瓶子，”許秋笑了笑，“不過二氯甲烷和石油醚，每種都訂了四桶，乙酸乙酯訂了兩桶，肯定是夠用了一段時間了。”
又過了一會兒，當軟件上實時顯示著當前B%為32%時，空白硅膠柱中終于出現了一抹紅色，紫外檢測器中也出現了明顯的信號。
“動了，它動了。”
“嗯，準備干活。”許秋將B%維持在30%。
硅膠柱中，那一抹紅色慢慢的變為一團紅色，接著又變為一條紅色。
當紅色的頭部到達空白色譜柱的下端后，許秋將收集模式從廢液模式改為工作模式。
淡紅色的溶液隨著一根針頭噴射入試管架上的1號試管中。
十幾秒后，1號試管裝滿，針頭自動移動至2號試管的位置，繼續噴射……
許秋也沒閑著，他用毛細管蘸取了少量1號試管中的溶液，然后用石油醚：二氯甲烷1:1配比進行點板。
他對比了此次點板的結果和上午的結果。“只有一個樣品點，而且還很淺，從位置來看，是那個主要產物的。”
韓嘉瑩則指了指上方的針頭。“這邊溶液噴的好快，感覺沒過多長時間，一跟試管就裝滿了。”
“我們用的是高壓液相色譜，流速是30毫升每分鐘，換算一下，一個試管的容積大約10毫升，差不多一分鐘四管左右吧，而普通的液相色譜通常僅為1毫升每分鐘，效率差了幾十倍。”許秋笑了笑道：
“現在的壓力只有30多個大氣壓，這臺儀器的最大承載壓力可達100大氣壓，對應的極限流速大概在60毫升每分鐘。”
“差距這么夸張呀，”韓嘉瑩疑惑道：“那這樣的話，不會降低分離效果嗎？”
“因為我們只有兩個樣品點，而且它們的分離程度比較高，所以并不用擔心這個問題。”許秋解釋道：“之后如果涉及比較難以分離的樣品，可以適當的降低流速，提高分離效果。”
……
隨著溶液繼續噴射，后面試管中液體的顏色也越來越紅。
第一次實操，許秋比較謹慎，每隔五個試管點一次板，判斷試管中的組分是否純凈。
幸運的是，均只有一個樣品點，而且在硅膠板上的爬升位置也都一致，表明是同一種產物。
二十多分鐘后。